Inteine bei Pilzen

Ein Intein ist eine in ein Protein eingeschobene Sequenz, die ihre eigene präzise Exzision aus einem Wirtsprotein sowie die Verknüpfung der flankierenden Sequenzen, der N- und C-Exteine, zum reifen Protein katalysiert. Dieser Vorgang, das Proteinspleißen, findet nach der Translation statt.
Wir haben Inteine im prp8-Gen von Pilzen analysiert. Das PRP8-Protein gehört zu den größten und am stärksten konservierten Kernproteinen und nimmt eine zentrale Position im katalytischen Zentrum des Spleißosoms ein. Wir haben das Proteinspleißen von PRP8-Mini-Inteinen aus Arten der Gattung Penicillium nachgewiesen und Inteine und Introns im prp8-Gen von vier Eupenicillium-Arten beschrieben. Ein pilzliches Mini-Intein konnte künstlich geteilt werden und spleißte dennoch in trans; zudem ließ sich ein eukaryotisches Mini-Intein weiter verkleinern.
Da sie kompakt sind und auch innerhalb fremder Proteine effizient spleißen, sind pilzliche PRP8-Inteine attraktiv für Intein-vermittelte Anwendungen im Protein-Engineering, etwa für die Proteinreinigung, die Kopplung fluoreszierender Biosensoren und die Expression cytotoxischer Proteine. Die Verbreitung, Evolution und Anwendungen pilzlicher Inteine haben wir in Übersichtsartikeln zusammengefasst.